ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ФЕНОСИНА НА ТЕЧЕНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ЯЗВЕННОГО КОЛИТА У КРЫС

Н. В. Деркач; Л. Н. Малоштан; Анас Фаттал

Национальный фармацевтический университет (г. Харьков, Украина)

Представлены результаты исследования влияния Феносина (таблетки на основе сухого экстракта коры осины и висмута субцитрата) на течение экспериментального язвенного колита у крыс в сравнении с растительным препаратом Альтан. Установлено, что Феносин оказывает выраженное противоязвенное, противовоспалительное и жаропонижающее действия на модели острого экспериментального колита у крыс, которые проявляются в уменьшении площади язв, степени повреждения слизистой оболочки толстого кишечника. Исследуемый препарат способствует восстановлению массы тела и температуры животных, не уступает, а в некоторых случаях превышает препарат сравнения Альтан, что свидетельствует о перспективности использования его в комплексной терапии воспалительных заболеваний толстого кишечника, а именно при неспецифическом язвенном колите.

Ключевые слова: Феносин, экстракт коры осины, язвенный колит, противоязвенная активность.

Введение. Неспецифический язвенный колит (НЯК) занимает одно из ведущих мест в общей структуре заболеваний желудочно-кишечного тракта (ЖКТ). В последние два десятилетия наблюдают рост числа больных НЯК как среди взрослых, так и среди детей всех возрастных групп [1, 5].

Выбор препаратов для терапии колитов данной патологии, которые дают возможность лечить заболевание консервативным путем, достаточно ограничен. С целью коррекции нарушений, вызванных язвенным поражением отделов толстого кишечника, возможно применение фитопрепаратов в комплексной схеме лечения. Поэтому одним из приоритетных направлений фармации и медицины является поиск и создание наиболее эффективных отечественных препаратов из растительного сырья, не уступающих по эффективности синтетическим, при этом обладающих низкой токсичностью, мягким терапевтическим действием, способностью комплексно влиять на различные звенья патологического процесса [4, 5, 7].

Фитопрепараты обладают хорошей переносимостью при длительном применении в разных возрастных группах [3, 11]. Результаты ранее проведенных фармакологических исследований экстракта из коры осины свидетельствуют о выраженной противовоспалительной, жаропонижающей, анальгезирующей, гепатопротекторной активностях [2, 4, 6].

Целью работы стало изучение специфической фармакологической (противоязвенной) активности Феносина при лечебно-профилактическом пути введения на модели экспериментального язвенного колита у крыс.

Материалы и методы. Исследования проводили на белых беспородных крысах массой 180–210 г в соответствии с требованиями биоэтики Национального фармацевтического университета, которые согласовываются с положениями «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей» (Страсбург, 1985). После завершения эксперимента крыс выводили из опыта в соответствии с этическими принципами экспериментов на животных [13].

Объектом исследования были таблетки на основе сухого экстракта коры осины и висмута субцитрата — Феносин, разработанные в Тернопольском государственном медицинском университете им. И.Я. Горбачевского под руководством проф. Т. А. Грошового [2, 8, 9]. Препаратом сравнения был выбран Альтан — противовоспалительный препарат растительного происхождения полифенольного состава, полученный из соплодий ольхи клейкой в дозе 1 мг/кг («Борщаговский ХФЗ», г. Киев) [5].

Экспериментальный колит с язвенными поражениями слизистой оболочки сигмовидной кишки вызывали уксусной кислотой по методу Fitzpatrik et al. Данный метод по гистоморфологическим и биохимическим показателям соответствует язвенному колиту у человека [12].

Животные были разделены на 3 группы: 1-я группа — животные с модельной патологией, 2-я группа — животные, получавшие Феносин в дозе 50 мг/кг, 3-я группа — животные, получавшие Альтан в дозе 1 мг/кг. Экспериментальным животным 4 дня до и 9 дней после моделирования колита вводили перорально Феносин и Альтан в соответствующих дозах.

Патологию воспроизводили путем введения наркотизированным крысам в толстую кишку 0,5 мл 10 % уксусной кислоты и через 10 сек — 3 см³ воздуха. Животных под наркозом выводили из эксперимента на 3, 6 и 9-е сутки лечения. Проводили визуальный осмотр: оценивали состояние слизистой оболочки толстой кишки (СОТК), количество язвенных поражений. Степень поражения оценивали в баллах по шкале: отек — 1 балл; гиперемия — 2 балла; кровоизлияния: точечные — 3 балла; слитые — 4 балла; эрозии: единичные, каждая эрозия — 5, эрозия с кровотечением — 6 баллов; язва — 7 баллов. Сумма баллов подсчитывалась для каждого животного. Измеряли площадь язв, массу тела и ректальную температуру экспериментальных животных на 3, 6, 9-е сутки лечения [10]. Статистическую обработку полученных результатов проводили при помощи программы «Statistica 6.0»

Результаты и обсуждение. НЯК, вызванный уксусной кислотой, сопровождается развитием выраженных деструктивных изменений СОТК с отеком, гиперемией и кровоизлияниями. При воспроизведении модельной патологии у крыс наблюдали признаки общей интоксикации организма, что выражалось увеличением двигательной активности, состоянием беспокойства и агрессивности. У животных, которым вводили Феносин и Альтан, эти признаки проявлялись в меньшей степени и отсутствовали к 3-м суткам лечения, а у животных группы контрольной патологии указанные признаки сохранялись на протяжении всего эксперимента. Первыми симптомами колита были понос с примесью слизи и крови, частые позывы на дефекацию, изменение динамики массы тела животных. Данные, характеризующие влияние Феносина в дозе 50 мг/кг и препарата сравнения Альтана в дозе 1 мг/кг на массу тела и температуру животных, представлены в табл. 1, 2.

Влияние Феносина на динамику массы тела крыс на модели экспериментального язвенного колита

Сроки исследования	Контрольная патология		Феносин, 50 мг/кг		Альтан, 1 мг/кг
Сроки исследования	n	x ± S_x	n	x ± S_x	n	x ± S_x
Исходные данные	11	210,3 ± 1,7	10	208,5 ± 2,9	10	210,9 ± 2,5
3-й день лечения	7	185,9 ± 1,3*	9	205,6 ± 2,4**	8	205,1 ± 2,2 **
6-й день лечения	5	189,6 ± 2,7*	8	207,9 ± 2,5 **	6	206,3 ± 2,6 **
9-й день лечения	5	204,9 ± 2,7	7	208,3 ± 2,3	6	210,7 ± 2,4

Примечание:
1) * — отклонение достоверно по отношению к исходным данным, р ≤ 0,05;
2) ** — отклонение достоверно по отношению к контрольной патологии, р ≤ 0,05;
3) n — количество животных в группе.

Как показали результаты эксперимента (табл. 1), у животных контрольной группы масса тела на 4-й день эксперимента достоверно снижалась на 12 %. К 10-му дню эксперимента масса тела животных восстанавливалась, но уступала исходным данным.

В группах животных, которым в лечебно-профилактическом режиме вводили Феносин и Альтан, не наблюдали достоверного снижения массы тела по отношению к исходным данным. В то же время, отмечали достоверное по отношению к группе контрольной патологии повышение массы тела крыс под влиянием исследуемых препаратов на 3-и и 6-е сутки лечения. На 9-е сутки масса тела животных опытных групп нормализовалась и соответствовала исходным данным.

Влияние Феносина на ректальную температуру крыс на модели экспериментального язвенного колита

Сроки исследования	Контрольная патология		Феносин, 50 мг/кг		Альтан, 1 мг/кг
Сроки исследования	n	x ± S_x	n	x ± S_x	n	x ± S_x
Исходные данные	11	37,04 ± 0,05	10	37,05 ± 0,06	10	37,15 ± 0,06
3-й день лечения	7	39,80 ± 0,12*	9	37,10 ± 0,04/*	8	38,31 ± 0,13/*
6-й день лечения	5	38,96 ± 0,09*	8	37,11 ± 0,07**	6	37,36 ± 0,05**
9-й день лечения	5	38,00 ± 0,04*	7	37,09 ± 0,23**	6	37,12 ± 0,09**

Примечание:
1) *— отклонение достоверно по отношению к исходным данным, р £ 0,05;
2) ** — отклонение достоверно по отношению к контрольной патологии, р ≤ 0,05;
3) *** — отклонение достоверно по отношению к препарату сравнения, р ≤ 0,05.

Анализируя показатели ректальной температуры (табл. 2), мы видим, что в группе животных контрольной патологии температура резко возрастала и на 3-и сутки была выше исходных данных на 2,7 °С (максимум повышения ректальной температуры) и выше, чем у животных опытных групп, получавших Феносин и Альтан.

В то же время, у животных, которым в лечебно-профилактическом режиме вводили Феносин, показатели ректальной температуры на 3, 6 и 9-е сутки лечения достоверно не отличались от исходных данных. Это подтверждает жаропонижающие свойства Феносина, изученные ранее [6].

У животных, которых лечили Альтаном, на 3-и сутки наблюдали пик температуры, но она была достоверно ниже, чем у животных группы контрольной патологии, но выше, чем у животных, которые получали Феносин. На 6-е и 9-е сутки лечения ректальная температура животных восстанавливалась и достоверно не отличалась от исходных данных.

Таким образом, Феносин эффективно снимает симптомы воспаления: нормализует показатели массы тела животных и ректальной температуры опытных животных на фоне экспериментального язвенного колита и по эффективности не уступает, а по жаропонижающей активности превосходит Альтан.

Во время исследования участков СОТК экспериментальных и контрольных животных были отмечены выраженные морфологические отличия. Визуально, с помощью лупы, осуществляли макроскопическое исследование СОТК. Результаты эксперимента представлены на рис. 1, 2.

Рис. 1. Влияние Феносина на площадь язв СОТК (см²) на фоне экспериментального язвенного колита у крыс:* — отклонение показателя достоверно относительно контрольной патологии, р ≤ 0,05

Рис. 2. Влияние Феносина на состояние СОТК (в баллах) на фоне экспериментального язвенного колита у крыс: * — отклонение показателя достоверно относительно контрольной патологии, р ≤ 0,05

Как показали экспериментальные данные, при макроскопическом исследовании участка слизистой толстого кишечника у животных группы контрольной патологии на 3-й день наблюдается выраженная гиперемия и отек слизистой оболочки, интенсивные кровоизлияния, многочисленные участки некроза, общая площадь которых составила 6,29 см². Выраженность воспалительного процесса составила 8,79 баллов, а длина поражения кишки составила 52 %. У животных контрольной патологии процессы регенерации происходили медленно, о чем свидетельствуют сохраняющиеся признаки воспаления: кровоизлияния, отечность, гиперемия.

На 10-й день эксперимента у животных группы контрольной патологии продолжают оставаться признаки воспаления, достоверно отличающиеся от животных, которых лечили Феносином и Альтаном: поражение слизистой оболочки составило — 4,33 бала, что в 3,1 раз выше, чем у животных опытных групп. На 10-й день эксперимента площадь некроза у животных в группе контроля патологии — 3,64 см², что в 7 раз выше, чем площадь у животных, получавших Феносин, и в 4 раза выше, чем у животных, которые получали Альтан.

У животных, которым вводили внутрижелудочно в лечебно-профилактическом режиме Феносин, на 3-й день лечения наблюдали достоверное уменьшение воспалительного процесса: его выраженность составила 5,62 балла, что в 1,6 раз ниже, чем у нелеченных животных, и в 1,2 раза выше, чем у животных, леченых Альтаном. Площадь некротических участков составила 3,21 см², что в 2,2 раза меньше, чем у животных группы контрольной патологии, и в 1,15 раз меньше, чем в группе животных, которым вводили Альтан. Длина пораженного участка кишки составила 22 %, что в 2,5 раза меньше, чем у животных группы контрольной патологии, и в 1,2 раза выше, чем у животных, леченых препаратом сравнения Альтан. На 6-й день лечения Феносином выраженность воспалительного процесса заметно уменьшилась: поражение слизистой оболочки составило 2,0 балла, что в 2,7 раз меньше, чем у животных в группе модельной патологии, и в 1,25 раза выше, чем у животных, которым вводили Альтан. Площадь язв в эти сроки уменьшилась соответственно в 2,3 раза по сравнению с нелеченными животными и в 1,3 раза по сравнению с животными, которых лечили Альтаном. На 9-е сутки лечения Феносином у животных некротические изменения СОТК были практически невыражены, т. е. произошли регенеративные процессы.

В группе животных, которым вводили препарат сравнения Альтан, также наблюдали положительные изменения со стороны состояния СОТК в сравнении с патологией, но процессы регенерации были менее выражены, чем у животных, которых лечили Феносином.

Таким образом, Феносин в дозе 50 мг/кг оказывает противовоспалительнй и противоязвенный эффекты на модели экспериментального язвенного колита, что подтверждается показателями состояния СОТК.